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內容簡介:
本书第一篇主要围绕查文献和选题、第二篇围绕实验技术、第三篇围绕实验仪器使用、第四篇围绕数据分析和论文写作,从最初的科研实验设计、实验实施到结果总结,整合分子生物学、生物化学、细胞生物学、遗传学、免疫学、统计学和生物信息学等多个学科,涉及各学科和各实验相关基础理论知识、实验技术、实验操作、统计学方法、科研思维、基本技能和基本规范,兼顾基础、进展、前沿、研究热点和发展趋势,有助于促进研究型、创新性及具有发展潜能的高素质医药学人才培养。在内容上涵盖基础理论、实验技术、操作流程、主要应用、常用科研技能和基本规范,同时突出新进展。
關於作者:
邓昊教授为国家新世纪优秀人才,湖南省医学学科领军人才培养对象,湖南省普通高校学科带头人,中南大学“升华学者计划”特聘教授。博士,美国Baylor College of Medicine神经病学系博士后。曾是美国Baylor医学院神经病学系最年轻的讲师,现任中南大学湘雅三医院医学实验中心主任,兼中南大学疾病基因组研究中心主任,同时是湘雅三医院临床检验诊断学学科带头人,有一定的国际影响力。
目錄 :
第一篇 文献检索与选题篇
第一章 文献检索/ 2
第 1节 中文文献检索 /2
第 2节 PubMed文献检索 /13
第 3节 Web of Science文献检索 /18
第二章 知云文献翻译软件使用/ 27
第三章 医学科研选题/ 31
第二篇 实验技术篇
第一章 核酸提取和定量/ 34
第 1节 真核细胞基因组DNA提取 /34
第 2节 真核细胞总RNA提取 /37
第 3节 凝胶中DNA的回收 /41
第 4节 质粒DNA小量提取 /42
第 5节 碱裂解法提取质粒详解 /44
第 6节 质粒DNA大量提取(碱裂解法) /46
第二章 核酸体外扩增/ 48
第 1节 PCR引物设计和特异性验证 /48
第 2节 OligoCalc引物分析 /57
第 3节 基础PCR /59
第 4节 高GC含量PCR体系 /64
第 5节 逆转录PCR /65
第 6节 miRNA PCR扩增 /67
第 7节 实时定量PCR /70
第 8节 巢式PCR /73
第 9节 降落PCR /75
第三章 核酸分离纯化和分析/ 78
第 1节 琼脂糖凝胶电泳 /78
第 2节 琼脂糖凝胶中DNA染色检测 /80
第 3节 聚丙烯酰胺凝胶电泳及DNA检测 /83
第 4节 核酸纯化 /86
第 5节 单链构象多态性分析 /91
第四章 质粒载体克隆和转化/ 94
第 1节 重组质粒构建 /94
第 2节 大肠埃希菌感受态细胞制备 /96
第 3节 质粒转化大肠埃希菌及菌落PCR鉴定 /97
第五章 序列分析/ 100
第 1节 桑格-库森法测序 /100
第 2节 TA克隆法测序 /104
第 3节 Chromas序列查阅 /110
第六章 真核细胞中导入基因/ 113
第 1节 磷酸钙法转染真核细胞 /113
第 2节 聚乙烯亚胺协助转染 /115
第七章 蛋白质提取和定量/ 118
第 1节 细胞蛋白质提取 /118
第 2节 蛋白质定量 /120
第 3节 C12多肿瘤标志物联合检测 /122
第八章 蛋白质相关分析/ 125
第 1节 蛋白质印迹法 /125
第 2节 蛋白质印迹法常用试剂配制 /130
第 3节 免疫沉淀法和免疫共沉淀法 /138
第 4节 免疫荧光技术 /140
第 5节 酶联免疫吸附测定 /142
第九章 DNA-蛋白质相互作用 /146
第 1节 电泳迁移率变动分析 /146
第 2节 染色质免疫沉淀法 /150
第 3节 双荧光素酶报告基因实验 /154
第十章 细菌接种、培养和鉴定 /157
第 1节 手卫生(七步洗手法) /157
第 2节 细菌培养基制备 /158
第 3节 细菌冻存和复苏 /160
第 4节 细菌接种技术 /161
第 5节 细菌涂片制作 /163
第 6节 细菌革兰氏染色 /164
第十一章 细胞培养/ 166