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| 編輯推薦： |
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本教材针对生物工程专业本科生和研究生教学中开设的生物化学、分子生物学和细胞生物学的基础、综合和创新性实验内容进行编写，所开设实验课内容是由实验老师根据课题和经验摸索形成，实验内容既有专业领域必修的实验技术，也包括当前新实验技术的应用以及与都市型农业人才培养相关的特色技术体系。
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| 內容簡介： |
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本教材由北京农学院生物与资源环境学院生物工程系及实验教学中心相关教师编写。全书内容共三章，分别为生物化学实验技术、分子生物学实验技术、细胞生物学实验技术。每章又分为基础实验、综合实验、创新实验三个层次的实验，涵盖了生物化学、分子生物学和细胞生物学的教学大纲要求，通过实验设计、实验材料、实验内容和实验操作等方面提升学生的理论知识、实践能力和创新能力。本教材在阐明相关实验内容的基础上，在附录中加入实验室安全相关知识等内容，增强教材的实用性。本书可作为高等院校生物类各专业本科生和研究生生物化学、分子生物学、细胞生物学实验教材，也可供从事生物科学工作的有关人员参考。
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| 關於作者： |
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刘悦萍，农学博士，2003年毕业于中国农业大学，硕士生导师。北京市科技新星，北京市中青年骨干教师，北京市属高等学校青年拔尖人才。主讲课程本科生课程：《生物化学》和《生物化学实验技术》，研究生课程：《生物化学与分子生物学》。主要从事果实优质生态安全的理论与实践的研究，对生长素调控果实发育成熟的分子机制及果实生态安全生产的具体实践措施开展相关的研究。累计发表学术论文30多篇，SCI收录10篇。主持完成国家自然科学基金2项，北京市自然基金1项、北京市项目1项，北京市委组织部项目1项，北京市“菜篮子”工程项目1项。参加北京市科委项目1项，北京市自然科学基金2项。
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| 目錄：
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第一章生物化学实验技术001
第一节生物化学基础实验001
实验一考马斯亮蓝G-250染料结合法测定水溶性蛋白质含量001
实验二酶的特异性及温度和pH值对酶活性的影响004
实验三淀粉酶活性的测定008
实验四血红蛋白的凝胶过滤色谱011
实验五SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质分子量014
实验六大肠杆菌16S rRNA基因的PCR及其琼脂糖凝胶电泳检测021
第二节生物化学综合实验024
实验一鸡卵黏蛋白的制备024
实验二胰蛋白酶粗提取与活性测定031
实验三亲和色谱纯化胰蛋白酶035
第三节生物化学创新实验040
实验一PcPKS1的原核表达和分离纯化040
实验二PcPKS1重组蛋白的浓缩和晶体生长049
第二章分子生物学实验技术055
第一节分子生物学基础实验055
实验一质粒DNA的分离与纯化055
实验二紫外分光光度法测定DNA浓度和纯度060
实验三琼脂糖凝胶电泳061
实验四DNA的酶切、回收与连接063
实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化065
第二节分子生物学综合实验068
实验一绿色荧光蛋白重组子的鉴定(菌落PCR法)068
实验二绿色荧光蛋白的诱导表达070
实验三绿色荧光蛋白的纯化072
第三节分子生物学创新实验074
实验一重组蛋白的表达075
实验二重组蛋白的纯化及鉴定077
实验三GST pulldown079
实验四免疫印迹081
第三章细胞生物学实验技术085
第一节细胞生物学基础实验085
实验一叶绿体的分离以及荧光显微镜的使用085
实验二细胞凝集反应089
实验三石蜡切片的制作及HE染色092
实验四动物细胞凋亡的诱导及检测095
第二节细胞生物学综合实验099
实验一植物细胞程序性死亡的诱导与形态观察099
实验二动物细胞融合102
实验三洋葱细胞骨架制备条件优化及影响因素研究104
第三节细胞生物学创新实验106
实验一动物细胞系的体外培养107
实验二GFP基因在HEK293T细胞中的转染与表达111
实验三免疫荧光技术研究蛋白质的亚细胞定位114
实验四利用荧光标记蛋白观察细胞自噬117
附录121
附录一实验室安全及防护知识121
附录二易制毒化学品目录122
附录三易制爆危险化学品目录124
附录四实验场地标志129
参考文献134
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| 內容試閱：
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生物工程专业是一门综合性的工程学科，它结合了多学科的知识，以应用为导向，旨在解决生物医药、农业、环保、能源等领域的重大问题。生物化学、分子生物学和细胞生物学的理论和技术是生物工程专业的基础，生物化学实验技术为生物工程专业提供丰富的实验手段，如大分子的分离纯化、色谱技术和电泳技术等；分子生物学实验技术在生物工程领域有广泛的应用价值，如重组蛋白的表达、纯化和鉴定，菌种和细胞的改造等；细胞生物学实验技术在基因工程、蛋白质工程和细胞培养等生物工程领域发挥重要作用，如干细胞技术和组织工程等。本教材同时编入基础性、综合性和创新性三个层次的实验，以提高学生的实践能力和创新能力。
本教材分为三章，第一章为生物化学实验技术，第二章为分子生物学实验技术，第三章为细胞生物学实验技术。每章由三节内容构成，分别是基础实验、综合实验和创新实验。基础实验旨在选取学科中最基础、最代表学科特点的实验方法和技术，着重培养学生的基本实验技能。综合实验由多层次的实验内容和多种实验技术组成，主要培养学生对各个学科所学理论知识和实验技术的综合运用能力、独立动手能力及对实验结果的综合分析能力。创新实验是根据专业和学科发展新技术的不断涌现，将科研成果转化为教学实验，旨在培养学生的创新精神、实践能力和科学素养，有助于提高学生的综合素质，为学生的学术研究和职业发展奠定坚实的基础。
本教材由刘悦萍、葛秀秀主编，卜春亚、陈青副主编，具体编写分工如下：第一章的第一节由卜春亚、张婧、黄体冉编写，第二节由刘悦萍、黄体冉编写，第三节由吕鹤书编写；第二章的第一、第二节由李晶、杨爱珍、刘雪连编写，第三节由葛秀秀、杨爱珍编写；第三章的第一、第二节由陈青、黄体冉、齐鹏编写，第三节由伊兆红、王飞编写。附录由王文平编写。初稿完成后，编写人员互相审阅修改，由刘悦萍、葛秀秀、卜春亚和陈青统稿。全书由马兰青主审。
由于编者水平所限，书中不足之处在所难免，恳请广大读者批评指正。
编者
2024年10月
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