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內容簡介: |
《现代组织学技术》既涵盖了组织形态学中**的切片技术,又重点介绍了近年来新发展的、具有较高实用价值的一系列新技术。《现代组织学技术》共十三章,主要包括组织样本制备技术、石蜡切片制作技术、冰冻切片制作技术、组织染色技术、组织化学技术、免疫组织化学技术、原位杂交组织化学技术、光学显微镜技术、电子显微镜技术、显微图像分析技术、流式细胞术、组织芯片技术和细胞凋亡检测技术,涵盖了生命科学类组织形态学教学和研究中必须掌握的实验技术,并对各种技术的原理、理论意义、应用价值、操作方法及操作中可能遇到的常见问题给予了较为细致的说明。
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目錄:
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目录前言第一章 组织样本制备技术 1第一节 组织样本采集 1一、实验动物的处死方法 1二、实验动物的解剖 2三、取样方法及注意事项 3四、细胞样本采集 4第二节 标本的固定 4一、固定的目的 4二、固定的对象 5三、常用的固定剂 5四、组织固定方法 9五、培养细胞的固定方法 10六、固定时应注意的事项 10七、组织固定后的洗涤 11第二章 石蜡切片制作技术 12第一节 组织固定后的处理 12一、组织块修整 12二、洗涤 12三、脱水 13四、透明 15五、透蜡(浸蜡)与包埋 16第二节 石蜡切片 18一、石蜡切片前的准备 18二、切片方法 19三、切片中容易出现的问题、原因及解决方法 21第三章 冰冻切片制作技术 22第一节 冰冻切片的取样及处理 22一、样品的处理 22二、组织的速冻 22第二节 冰冻切片 23一、恒温冷冻切片机 23二、切片方法及步骤 24三、冰冻切片固定液选择 25四、冰冻切片染色方法 25五、冰冻切片的优缺点和注意事项 25第四章 组织染色技术 28第一节 染色的原理 28一、染色的发展 28二、染料 28三、染色的原理 30第二节 染色方法 32一、整体染色法 32二、组织块染色法 32三、蜡带染色法 32四、切片染色法 32五、涂片染色法 32六、活体染色法 33第三节 苏木精-伊红染色法 33一、苏木精-伊红染色的基本原理 33二、苏木精-伊红染色的基本方法 33三、二甲苯在H-E染色中的作用 35四、乙醇在H-E染色中的作用 36五、水洗的作用 36六、分化和蓝化 37七、切片制作中出现的问题、原因及解决方法 37第四节 特殊染色方法 38一、瑞特染色法 38二、巴氏染色法 38三、迈-格-吉染色方法 39第五章 组织化学技术 40第一节 蛋白质和氨基酸的组织化学技术 40一、蛋白质的组成及分类 40二、蛋白质和氨基酸的染色方法 41第二节 脂类(脂质)的组织化学技术 43一、锇酸法显示非饱和脂质 43二、苏丹黑B染色法显示脂类 44三、Fischler脂肪酸染色法 44四、Daddi酒精性苏丹Ⅲ法 44五、高氯酸-萘醌(PAN)法显示胆固醇 45六、酸性苏木红法显示磷脂 45第三节 酶组织化学技术 46一、酶的分类 46二、酶的组织化学反应法 47三、影响显示酶的因素 47四、水解酶的显示 48五、胆碱酯酶的显示 49六、氧化酶及过氧化物酶 51七、Sato显示骨髓、血液涂片的过氧化物酶法 52八、琥珀酸脱氢酶 52第四节 多糖组织化学技术 52一、过碘酸-Schiff反应 52二、阿尔辛蓝-PAS法 53第五节 核酸组织化学技术 54一、Feulgen反应显示脱氧核糖核酸 54二、甲基绿-派洛宁显示脱氧核糖核酸和核糖核酸 54三、核酸荧光染色 55第六节 凝集素组织化学技术 59一、凝集素的标记物 59二、染色步骤 59第七节 生物胺荧光组织化学技术 61一、Falck-Hillarp甲醛诱发荧光法 61二、乙醛酸诱发生物单胺荧光法 62三、邻苯二醛显示组胺荧光法 62第六章 免疫组织化学技术 64第一节 免疫组织化学技术的原理、分类和发展 64一、免疫组织化学技术的基本原理 64二、免疫组织化学技术的分类 65三、免疫组织化学的特点 65四、免疫组织化学的发展 66第二节 免疫组织化学标本制备 68一、取样 69二、固定 69三、脱水、浸蜡及包埋 70四、切片 70五、烤片 71六、标本防脱落技术 71七、对照试验 71八、抗原修复 71九、免疫组织化学结果的判断 73第三节 免疫荧光组织化学技术 74一、直接法 74二、间接法 74三、补体法 75四、双重标记法 75五、非特异性荧光染色的抑制或消除 76第四节 免疫酶组织化学技术 77一、酶标记抗体法(酶标法) 77二、非标记抗体酶法 77三、免疫酶双标记法 80第五节 亲和免疫组织化学技术 80一、亲和免疫组织化学技术的基本原理 81二、亲和免疫组织化学技术的基本方法 81三、亲和免疫组织化学技术的操作步骤 82第六节 免疫金组织化学技术 83一、免疫胶体金技术 83二、蛋白A胶体金技术 84三、免疫金银染色 85第七节 免疫组织化学增敏方法 86一、多聚螯合物酶法 86二、催化信号放大系统 87第八节 双重或多重免疫组织化学染色技术 88一、基本染色形式 89二、阻断法单酶或双重酶免疫组织化学染色 90三、阻断法双重免疫荧光组织化学染色 91四、非阻断法单酶或双酶双重免疫组织化学染色 91五、非阻断法双重免疫荧光组织化学染色 92六、其他类型组合的双重免疫染色 92七、三重免疫染色 93第九节 免疫组织化学结果判定及注意事项 93一、免疫组织化学染色结果判断原则 93二、非特异性染色 94三、常见问题与处理方法 94第七章 原位杂交组织化学技术 99第一节 原位杂交组织化学的基本原理 99一、核酸的分子结构 99二、核酸的理化性质 100三、核酸分子杂交的基本原理 101四、核酸探针的种类 101五、核酸分子杂交的类型 102第二节 原位杂交组织化学技术的基本方法 102一、杂交前准备 102二、杂交 104三、杂交后处理 105四、检测 105五、对照试验 105第三节 荧光原位杂交技术 105一、荧光原位杂交探针 106二、荧光原位杂交技术类型 106三、多色荧光原位杂交技术 107第四节 原位PCR技术 107一、原位PCR的基本原理 107二、原位PCR的技术类型 108三、原位PCR的技术特点 109第五节 双重和多重原位杂交技术 110一、放射性核素和非放射性标记探针的双重标记原位杂交 110二、非放射性标记探针的双重标记原位杂交 111三、两种放射性核素标记探针的双重标记原位杂交 111第六节 原位杂交结合免疫组织化学技术 111一、原位杂交在先 112二、免疫组织化学在先 112第八章 光学显微镜技术 114第一节 普通光学显微镜 114一、普通光学显微镜成像原理 114二、光学显微镜基本结构 115三、光学显微镜技术指标 117四、光学显微镜照明技术 119五、普通光学显微镜的使用与保养 120第二节 倒置显微镜 121第三节 相差显微镜 121一、相差显微镜成像原理 122二、相差显微镜装置 123第四节 荧光显微镜 123一、荧光的产生 123二、荧光显微镜的组成 124三、荧光素 125四、荧光显微镜主要用途 126五、荧光显微镜使用的主要注意事项 127第五节 激光扫描共聚焦显微镜 127一、基本原理 128二、激光扫描共聚焦显微镜的基本结构 129三、激光扫描共聚焦显微镜的主要特点 130四、共聚焦显微镜图像模式 130五、激光扫描共聚焦显微镜的主要应用 133六、双光子(多光子)激光共聚焦显微镜 134第六节 其他光学显微镜技术 135一、暗视野显微镜 135二、近场光学显微镜 136三、原子力显微镜 138第九章 电子显微镜技术 141第一节 透射电子显微镜技术 141一、透射电镜术的基本原理 141二、超薄切片技术 143三、观察与记录 149四、冷冻超薄切片技术 150五、冷冻断裂技术 151第二节 扫描电子显微镜技术 152一、扫描电镜术的基本原理 152二、扫描电镜生物样品制备的基本方法 154三、特殊扫描电镜生物样品制备方法 157第十章 显微图像分析技术 159第一节 显微图像分析系统的基本原理 159第二节 生物显微图像分析系统 160一、生物显微图像分析系统的组成 160二、生物显微图像分析系统软件组成 162第三节 显微图像处理 164一、数字图像处理原理 164二、图像处理的基本步骤 164第四节 生物显微图像分析 170一、二维几何参数测量 170二、体视学参数测量 172三、光度学参数测量 175第五节 显微图像分析质量控制 177一、图像分析的误差因素 177二、图像分析误差的计算 178三、图像分析的误差控制 179第六节 国内外图像分析仪 180一、国产图像分析仪的情况简介 180二、国外图像分析仪的情况简介 181第十一章 流式细胞术 183第一节 流式细胞仪原理和组成 183一、流式细胞术分析的基本原理 183二、流式细胞仪的基本结构 184第二节 荧光素 186一、荧光 186二、荧光素的特性 186三、常用的荧光素 188第三节 流式细胞仪样本制备和标记方法 189一、实验准备阶段 189二、样本处理 189三、荧光染色 190四、细胞分选 190第四节 流式细胞仪的数据处理 190一、数据的显示 190二、数据的分析 191第五节 流式细胞仪的应用 191一、细胞周期检测 191二、细胞凋亡检测 192三、细胞增殖检测 192四、细胞膜标记检测——淋巴细胞亚群 192五、细胞质标记检测——细胞内细胞因子检测 192六、流式细胞仪分选技术 192七、染色体分析 194第十二章 组织芯片技术 195第一节 生物芯片 195一、生物芯片简介 195二、生物芯片的种类 196第二节 组织芯片技术 197一、组织芯片的制备 197二、组织芯片结果分析 199三、组织芯片的优点与问题 200第十三章 细胞凋亡检测技术 202第一节 细胞凋亡的形态学检测 202一、普通光学显微镜观察法 203二、荧光显微镜检测法 203三、电子显微镜观察法 204第二节 凋亡的细胞膜结构改变检测 205第三节 凋亡细胞的流式细胞术检测 206一、PI染色法 206
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