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內容簡介: |
《细胞生物学层次化实验指导(第三版)》在上一版的基础上修订而成,是***一流本科课程配套教材、科学出版社“十四五”普通高等教育本科规划教材。《细胞生物学层次化实验指导(第三版)》包含6章内容及附录,6章分别是细胞生物学研究方法概述、细胞生物学诺贝尔奖研究发现之旅、细胞生物学先进仪器设备、基础性实验、综合性实验和探究性实验;附录包括常用溶液配制方法、细胞生物学实验教学方法案例等内容。数字资源包括部分难点实验操作和先进仪器使用视频、部分实验结果图片等,可扫描二维码查阅。高校授课教师可申请教学课件。
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目錄:
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目录第三版前言第一章 细胞生物学研究方法概述 1第一节 细胞制片方法 1第二节 细胞化学技术 3第三节 细胞获取与分离方法 4第四节 细胞工程技术 7第五节 基因编辑技术 14第六节 单细胞测序技术 15第七节 细胞代谢组学分析方法 16第八节 细胞能量代谢分析 18第九节 活细胞成像技术 21第二章 细胞生物学诺贝尔奖研究发现之旅 23第一节 细胞感知和适应氧变化机制发现之旅 23第二节 T细胞表面的免疫负调节分子发现之旅 24第三节 细胞自噬机制发现之旅 26第四节 构成大脑定位系统的细胞发现之旅 27第五节 细胞囊泡运输系统及其调控机制发现之旅 29第六节 细胞重编程及诱导性多能干细胞发现之旅 31第七节 染色体端粒及端粒酶对染色体的保护机制发现之旅 32第八节 器官发育和程序性细胞死亡的基因调节发现之旅 33第九节 蛋白质地址签的发现之旅 35第十节 G蛋白及其在细胞中的信号转导作用发现之旅 36第十一节 蛋白质可逆磷酸化作用的生物调节机制发现之旅 37第三章 细胞生物学先进仪器设备 39第一节 细胞观察及形态分析设备 39第二节 细胞分选设备 52第三节 细胞制片设备 57第四节 细胞破碎设备 60第五节 细胞活力检测设备 62第四章 基础性实验 66第一节 细胞制片及染色观察 66实验1 血细胞涂片的制备及染色观察 66实验2 植物叶片组织徒手切片的制备及观察 68实验3 动物组织冰冻切片的制备及染色观察 69第二节 细胞获取与分离 70实验4 研磨低渗法分离小鼠脾脏单个核细胞 70实验5 酶解法制备植物原生质体 72实验6 密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 74实验7 小鼠腹腔巨噬细胞的富集与分离 75第三节 细胞器和细胞组分显示 76实验8 植物细胞线粒体和液泡的超活染色及观察 76实验9 酸性磷酸酶法显示巨噬细胞溶酶体 78实验10 牛蛙胸骨剑突软骨细胞高尔基体的中性红染色 79实验11 细胞中过氧化物酶体的显示 80实验12 细胞中多糖和游离脂的显示 82实验13 **细胞化学法显示细胞DNA和RNA 83实验14 考马斯亮蓝染色法显示细胞骨架 85第四节 细胞大小测量与细胞计数 88实验15 细胞大小的显微测量 88实验16 细胞计数 89第五节 细胞生理 91实验17 哺乳动物红细胞膜的通透性检测 91实验18 植物细胞质壁分离现象观察及质壁分离法测定基态渗透势 93实验19 小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象观察及吞噬活性检测 94实验20 细胞运动观察实验 96实验21 台盼蓝染色法鉴别死活细胞 98第六节 细胞分裂 99实验22 压片法制备植物细胞分裂标本及显微观察 99实验23 花粉母细胞减数分裂标本制备 101实验24 滴片法制备悬浮细胞分裂标本 102实验25 去壁低渗法制备植物细胞染色体分散标本 105第七节 细胞裂解及效果检测 106实验26 小鼠腹水瘤细胞裂解及乳酸脱氢酶活性检测 107第八节 细胞器分离 108实验27 植物细胞叶绿体的分离 109实验28 动物细胞线粒体的分离 110实验29 胞外囊泡提取 112第五章 综合性实验 115第一节 细胞分选 115实验30 免疫磁珠分选法分离小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞 115实验31 T细胞的免疫荧光标记及流式细胞仪分选实验 117第二节 细胞培养与细胞融合 119实验32 贴壁细胞的原代培养实验 120实验33 贴壁细胞的传代培养实验 122实验34 小鼠骨髓单个核细胞集落形成实验 124实验35 PEG介导的细胞融合实验 125第三节 细胞冻存与复苏 127实验36 细胞冻存与解冻复苏实验 128第四节 细胞增殖与活力检测 130实验37 MTT比色法检测细胞增殖与活力 131实验38 CCK8法检测细胞增殖与活力 132实验39 ATP生物荧光法检测羟基喜树碱对腹水瘤细胞活力的影响 134第五节 免疫细胞化学 136实验40 免疫荧光法显示细胞骨架 136实验41 酶免疫细胞化学法显示小鼠脾脏淋巴细胞 138第六节 细胞黏附与迁移分析实验 140实验42 肿瘤细胞黏附能力分析实验 140实验43 检测肿瘤细胞侵袭能力的Transwell小室实验 142实验44 肿瘤细胞迁移的划痕实验 143第七节 细胞的激活及信号转导分子检测 145实验45 利用钙离子荧光探针检测细胞内Ca2+浓度 145实验46 信号蛋白磷酸化水平检测实验 147实验47 转录因子NF-κB活性检测实验 149第八节 哺乳动物细胞转基因及表达检测 151实验48 绿色荧光蛋白基因转染体外培养的小鼠成纤维细胞及表达检测 152第九节 细胞周期调控与检测 154实验49 利用流式细胞术分析细胞周期时相 155实验50 细胞周期蛋白D1基因转染细胞及细胞周期检测 157实验51 胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)双阻断法同步化培养的动物细胞 159实验52 秋水仙胺阻抑法分离贴壁培养的哺乳动物M期细胞 160实验53 植物细胞中期同步化诱导 161第十节 分裂细胞微核的诱导与检测(细胞遗传毒性) 162实验54 蚕豆根尖细胞微核的诱导与检测 163实验55 小鼠骨髓多染性红细胞的诱导与检测 164实验56 小鼠精巢细胞微核的诱导与检测 166第六章 探究性实验 169第一节 肿瘤细胞诱导凋亡及检测 169实验57 涂片染色法检测凋亡细胞 169实验58 利用激光共聚焦显微镜及流式细胞仪检测Annexin V-FITC/PI染色的凋亡细胞 171实验59 凋亡细胞DNA的梯状条带电泳 172实验60 TUNEL技术原位检测显示凋亡实体瘤细胞 175第二节 细胞自噬的诱导及检测 177实验61 MDC染色法检测饥饿法诱导自噬的巨噬细胞 178实验62 GFP-LC3基因转染法显示无血清饥饿法诱导形成的自噬体 180第三节 细胞衰老的诱导与检测 181实验63 H2O2诱导细胞衰老及胞内衰老相关的β-半乳糖苷酶检测 182实验64 衰老细胞ROS的流式细胞仪检测 183第四节 细胞分化的诱导及检测 185实验65 骨髓造血干细胞的诱导分化实验 187实验66 维甲酸诱导肿瘤细胞分化及检测实验 189第五节 基因沉默与编辑 191实验67 RNA干扰沉默绿色荧光蛋白基因 193实验68 CRISPR-Cas9技术定向敲除哺乳动物细胞基因 194第六节 细胞端粒酶活性检测实验 198实验69 肿瘤细胞的端粒酶活性检测 199附录 202附录一 常用溶液配制方法 202附录二 腹水瘤小鼠模型建立方法 203附录三 细胞培养前的准备工作 204附录四 细胞生物学实验教学方法案例 206
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