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| 內容簡介： |
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《细胞培养技术》获首届全国优秀教材奖，入选“十四五”职业教育国家规划教材。教材秉持“做中学、行中导”理念，构建符合企业细胞培养岗位需求和学生成长规律的内容体系，同时融入项目教学、任务驱动和行为引导等现代职教方法，聘请企业一线专家参与教材建设，开发企业真正用得上的教学内容。教材中的六个模块均取材于企业典型工作任务，包括“动物细胞培养的准备”“动物细胞的原代培养”“动物细胞的传代、冻存和复苏”“动物细胞的大规模培养”“单克隆抗体生产细胞的制备”和“植物细胞的悬浮培养”，这些模块又被细分为15项具体任务。教材采用“富媒体”编写理念，每个模块都附有配套的实操视频、图片和教学课件等多种数字资源，读者通过扫描二维码，即可获得制作精良的多媒体学习素材。另外，本书每个任务还附有配套的《学生工作手册》以引导教材使用者自主学习。教材全面贯彻党的教育方针，落实立德树人根本任务，有机融入党的二十大精神。本教材适合高等职业院校生物技术相关专业使用，也可作为生物技术人员的参考书和培训教材。
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| 關於作者： |
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兰蓉，女，三级教授，博士，扎根高职教科研一线23年，具有较高的师德素质、专业水准和教学教改水平，在教学改革、科研和社会服务等诸多方面成果较突出，先后被授予“北京市高等学校教学名师”“北京市优秀教师”“北京市师德先进个人”等荣誉称号。曾获首届国家优秀教材奖，主编出版职业教育国家规划教材2本和北京市精品立项教材1本，参编教学论著5本；获得国家教育教学成果一等奖、北京市教育教学成果特等奖、一等奖和二等奖各1项；发表科研论文50多篇，获得国家发明专利授权9项；完成厅局级以上科研项目6项，主持完成横向课题6项。在同行业中具有一定影响力，现任药品教指委药品食品质量管理类专委会委员和石化教指委医用中间体专委会委员。
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| 目錄：
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模块一动物细胞培养的准备 001
【背景描述】 001
【学习目标】 001
【模块任务】 002
任务1-1动物细胞培养器材的准备 002
● 知识 002
一、动物细胞培养的基本概念及优缺点 002
二、动物细胞培养的环境条件 005
三、动物细胞培养实验室的设计与布局 006
四、动物细胞培养设备 007
五、动物细胞培养用品 011
● 操作规程 016
一、动物细胞培养常用设备的使用 016
二、动物细胞培养用品的清洗、包装和灭菌 018
任务1-2动物细胞培养用液的准备 020
● 知识 020
一、培养细胞的营养需要 020
二、动物细胞培养用液 022
三、动物细胞培养常用的消毒和无菌处理方法 028
四、动物细胞培养工作的基本要求和工作方法 030
● 操作规程 032
一、动物细胞培养用液的配制和无菌处理 032
二、动物细胞培养的无菌操作 034
【拓展知识】 035
一、动物细胞培养发展史 035
二、动物细胞培养的应用 037
三、动物细胞培养的其他常用液 039
【巩固提升】 040
一、巩固练习 040
二、进阶训练 042
模块二动物细胞的原代培养 043
【背景描述】 043
【学习目标】 043
【模块任务】 044
任务2-1组织块法培养鸡胚成纤维细胞 044
● 知识 044
一、培养细胞的细胞生物学 044
二、培养细胞的取材 051
三、组织块培养法 052
四、培养细胞的观察和检测技术 054
● 操作规程 059
一、鸡胚成纤维细胞的原代培养（组织块法） 059
二、体外培养细胞的常规观察 061
任务2-2消化法培养鸡胚成纤维细胞 062
● 知识 062
一、组织材料的分离 062
二、消化培养法 064
三、细胞计数 065
● 操作规程 066
鸡胚成纤维细胞的原代培养（消化法） 066
【拓展知识】 068
一、动物正常组织细胞的培养 068
二、肿瘤细胞培养 071
【巩固提升】 075
一、巩固练习 075
二、进阶训练 076
模块三动物细胞的传代、冻存和复苏 077
【背景描述】 077
【学习目标】 077
【模块任务】 078
任务3-1鸡胚成纤维细胞的传代培养 078
● 知识 078
一、动物细胞传代培养技术 078
二、细胞系的维持 080
● 操作规程 080
鸡胚成纤维细胞的传代 080
任务3-2鸡胚成纤维细胞的冻存和复苏 082
● 知识 082
一、细胞冻存技术 082
二、细胞复苏技术 084
三、细胞活性检查方法 084
● 操作规程 086
一、鸡胚成纤维细胞的冻存 086
二、鸡胚成纤维细胞的复苏 087
三、鸡胚成纤维细胞的活性检查 088
【拓展知识】 089
一、培养细胞的运输和短期保存 089
二、干细胞培养 090
三、三维细胞培养 093
【巩固提升】 096
一、巩固练习 096
二、进阶训练 097
模块四动物细胞的大规模培养 098
【背景描述】 098
【学习目标】 098
【模块任务】 099
任务4-1CHO细胞大规模贴壁培养 099
● 知识 099
一、动物细胞大规模培养的一般工艺流程 099
二、动物细胞大规模贴壁培养常用的方法 099
● 操作规程 104
发酵罐大规模贴壁培养CHO细胞 104
任务4-2CHO细胞大规模悬浮培养 108
● 知识 108
一、动物细胞大规模悬浮培养技术 108
二、动物细胞培养反应器 109
三、动物细胞大规模培养技术的操作方式 116
● 操作规程 118
一次性生物反应器大规模悬浮培养CHO细胞 118
【拓展知识】 121
一、动物细胞大规模培养常用细胞系 121
二、细胞生物反应器放大技术 123
三、动物细胞固定化培养 126
【巩固提升】 127
一、巩固练习 127
二、进阶训练 129
模块五单克隆抗体生产细胞的制备 130
【背景描述】 130
【学习目标】 131
【模块任务】 131
任务5-1人PD-L1免疫动物的准备 131
● 知识 131
一、单克隆抗体的概念 131
二、杂交瘤技术制备单克隆抗体的基本原理 132
三、杂交瘤技术制备单克隆抗体的主要过程 132
四、动物免疫 132
● 操作规程 133
人PD-L1免疫小鼠的准备 133
任务5-2骨髓瘤细胞和脾细胞的融合与筛选 135
● 知识 135
一、脾细胞、骨髓瘤细胞及饲养细胞的准备 135
二、细胞融合和杂交瘤细胞的筛选 136
● 操作规程 138
骨髓瘤细胞与脾细胞的融合（PEG融合法） 138
任务5-3抗人PD-L1杂交瘤细胞的筛选 140
● 知识 140
一、酶联免疫吸附法 140
二、双向扩散法 141
● 操作规程 142
酶联免疫吸附法筛选阳性杂交瘤细胞 142
任务5-4抗人PD-L1杂交瘤细胞的单克隆化 143
● 知识 143
一、有限稀释法 144
二、软琼脂平板法 144
三、显微镜操作法 144
四、流式细胞荧光分选技术 144
● 操作规程 145
有限稀释法单克隆化阳性杂交瘤细胞 145
【拓展知识】 146
一、杂交瘤技术的诞生 146
二、杂交瘤细胞株的冻存和复苏 147
三、单克隆抗体的大量制备与纯化 147
四、细胞的基因转染技术 148
【巩固提升】 151
一、巩固练习 151
二、进阶训练 152
模块六植物细胞的悬浮培养 153
【背景描述】 153
【学习目标】 153
【模块任务】 154
任务6-1MS培养基的制备 154
● 知识 154
一、植物组织和细胞培养的基本概念 154
二、植物细胞培养的实验室条件 157
三、植物细胞培养的培养基 162
● 操作规程 169
MS培养基的配制和灭菌 169
任务6-2胡萝卜愈伤组织的诱导 172
● 知识 172
一、外植体的选择和预处理 172
二、植物愈伤组织的形成过程 174
三、植物愈伤组织培养的一般程序 175
四、植物组织细胞培养的无菌操作 176
● 操作规程 176
胡萝卜愈伤组织的诱导和继代 176
任务6-3胡萝卜细胞的悬浮培养 177
● 知识 178
一、单细胞的分离 178
二、悬浮培养细胞的生长和测定 179
三、植物细胞悬浮培养方式 180
四、悬浮培养细胞的同步化 182
五、植物细胞培养的环境条件 183
● 操作规程 185
胡萝卜悬浮细胞系的建立与继代 185
【拓展知识】 186
一、植物组织细胞培养的发展史 186
二、植物组织细胞培养的应用 188
三、植物细胞的固定化培养 190
四、植物单细胞培养 192
【巩固提升】 195
一、巩固练习 195
二、进阶训练 196
附录细胞培养技术常用术语中英文对照 197
参考文献 201
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| 內容試閱：
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细胞培养技术是生物技术的重要组成部分，现已广泛应用于生物学、医学、生物制药等多个领域。随着国家战略性新兴产业——生物医药产业的蓬勃发展，细胞培养技术更是成为高等职业院校药品生物技术、生物制药技术等生物相关专业学生的核心技能之一。为紧跟生物医药产业的快速发展及高职教育教学改革的需求，本教材基于全国优秀教材二等奖获奖教材、“十四五”职业教育国家规划教材、“十二五”职业教育国家规划教材《细胞培养技术》（第二版），秉持“做中学、行中导”理念，构建符合企业细胞培养岗位需求和学生成长规律的教材内容体系，同时融入项目教学、任务驱动和行为引导等现代职教方法，为学生未来在生物医药领域的职业发展奠定坚实的基础。
教材中的六个模块均取材于企业典型工作任务，依次为“动物细胞培养的准备”“动物细胞的原代培养”“动物细胞的传代、冻存和复苏”“动物细胞的大规模培养”“单克隆抗体生产细胞的制备”及“植物细胞的悬浮培养”。这些模块被细分为15项具体任务，并以实践教学为主线，配以的专业知识、工作规范和职业素养，同时践行党的二十大强调的“落实立德树人根本任务，培养德智体美劳全面发展的社会主义建设者和接班人”，坚持为党育人、为国育才，引导学生爱党报国、敬业奉献、服务人民。
教材采用“富媒体”编写理念，每个模块都附有丰富的实操视频、教学课件和图片等多种数字资源，读者通过扫描二维码，即可获得制作精良的多媒体学习素材，便于学生“做中学”和教师“做中教”。此外，本书还配套《学生工作手册》，旨在引导学生按普适性工作过程完成模块任务。
参与本书编写的人员既包括具有丰富细胞培养技术教学经验的资深教师，也有在企业细胞培养岗位上深耕多年的技术人员。其中，边亚娟、王瑞丽和李双石等主要负责模块一和模块二的编写工作；金丽华、周珍辉等主要负责模块三的编写工作；吕健龙、李璐和王贵霞等主要负责模块四的编写工作；冯晖、李莹等主要负责模块五的编写工作；秦静远、金小花等主要负责模块六的编写工作；兰蓉负责全书整体结构和内容的设计，并统筹全书的编写和整理定稿。
本书在编写与出版过程中，得到了化学工业出版社、中国医学科学院基础医学研究所、北京义翘神州科技股份有限公司和北京四环生物制药有限公司等单位的大力支持。中国医学科学院基础医学研究所的刘玉琴研究员审阅了全部书稿，并对本书的构架和内容提出了许多建设性意见。中国医学科学院基础医学研究所细胞中心、北京义翘神州科技股份有限公司和北京四环生物制药有限公司等单位在配套音像资料的拍摄上做了大量工作。在此，作者谨向化学工业出版社、中国医学科学院基础医学研究所、北京义翘神州科技股份有限公司和北京四环生物制药有限公司等单位致以诚挚的感谢。
《细胞培养技术》历经2次修订和多次重印，教材内容动态更新并不断完善，但书中难免会有疏漏与不当之处，敬请广大读者批评指正。
编者
2025年6月
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